ДОСЛІДЖЕННЯ НУКЛЕАЗНОЇ АКТИВНОСТІ КЛІТИННИХ
ЛІЗАТІВ МЕТОДОМ РЕНАТУРАЦІЇ БІЛКІВ У
ПОЛІАКРИЛАМІДНОМУ ГЕЛІ

Ю. Кіт, Г. Шуваєва, В. Дрель, Н. Ігуменцева, Л. Дробот


Інститут біології клітини НАН України,
вул. Драгоманова, 14/16, м. Львів 79005, Україна,
e-mail: kit@biochem.lviv.ua

Метод аналізу ферментативної активності в поліакраламідному гелі ґрунтується на високоефективному розділенні білків ДСН-електрофорезом із наступною їх ренатурацією і детекцією ферментативної активності. Його ми використали для аналізу експресії нуклеаз в клітинах у культурі ліній HEK293; NIH/3T3; U937. З’ясовано, що в клітинах HEK293 експресуються нуклеази молекулярною масою 47 і 45 кДа. Описано локалізацію цих нуклеаз у ядрах клітин. Доведено, що препа- рати гістонів, оброблені денатувальними агентами, можуть гідролізувати ДНК.


Ключові слова: культури клітин, клітинне ядро, нуклеази, електрофорез.


Повний текст (PDF)