|
СТВОРЕННЯ СИСТЕМИ КЛОНУВАННЯ ГЕНІВ ДЛЯ
STREPTOMYCES CYANOGENUS S136
А. Лужецький*, М. Федоришин*, Д. Хофмейстер**, А. Бехтольд**,
В. Федоренко*
*Львівський національний університет імені Івана Франка,
вул. Грушевського, 4, м. Львів 79005, Україна,
e-mail: genetic@franko.lviv.ua,
**Albert-Ludwigs-University of Freiburg, Pharmazeutische Biologie,
Stefan-Meier-Strasse 19, Freiburg D-79104, Germany,
e-mail: bechthold@uni-freiburg.de
|
Метод міжродової кон’югації було використано для введення рекомбінантних
ДНК в штам Streptomyces cyanogenus S136. Плазміди pSET152, pSOK101,
pSOK201, pCHZ101 були перенесені з донорного штаму Escherichia coli ET12567
(pUB307). Показано, що інтеграція pSET152 в хромосому S. cyanogenus S136 не
має негативного ефекту на біосинтез ландоміцину А. З допомогою гібридизаційного
аналізу виявлено, що плазміда pSET152 інтегрується в два attB сайти хромосоми
S. cyanogenus S136. Плазміда pSET152 успадковувалась з частотою 100% в неселективних
умовах. Було сконструйовано серію нереплікативних плазмід з різними
за розміром вставками з lan-кластеру. Показано ефективність проходження
гомологічної рекомбінації між клонованими фрагментами і відповідними ділянками
хромосоми штаму S. cyanogenus S136.
|
Ключові слова: Streptomyces, ангуциклінові антибіотики, кон’югація.
|
|